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大鼠麻醉指导原则
目的
本文旨在提供一般建议,该建议并不意味着其包含所有适用于大鼠的麻醉用药物及其组合,具体的麻醉方案应根据特定情况和研究需求与所在机构的兽医合作制定。麻醉使动物完全或部分失去感觉,过程中伴随或不伴随意识丧失。在动物手术、可能引起疼痛的非手术操作及需要固定动物的非疼痛操作等情景下都有可能实施麻醉操作。在麻醉前、麻醉过程中和麻醉后,必须采取措施确保动物的健康和麻醉的有效性。麻醉可通过胃肠外给药或吸入给药的方式进行。药物的选择取决于具体操作、研究目的和动物年龄等其他因素。如对药物选择有疑问,请咨询所在机构的兽医。
一般原则和注意事项
• 适应期:建议所有动物在运输后适应一周,以防止应激引起的反应。动物至少需要72小时才能恢复到基本生理状态。
• 禁食:由于大鼠无法呕吐,通常麻醉前无需禁食。然而,如需禁食(例如为了保持体重),因大鼠的高代谢率,禁食时间不应超过2-3小时。请注意,切勿限制饮水。
• 眼睛保护:在麻醉状态下,大鼠的眼睛会持续睁开,可能导致角膜干燥和损伤。因此,在如下条件下,应涂抹眼膏来保护眼睛。
○ 麻醉持续时间超过 5 min;
○ 通过面罩进行麻醉;
• 监护:无论使用何种麻醉剂,均应监测麻醉状态下的大鼠,以确保心脏和呼吸功能不被过度抑制,以及麻醉深度适当。
无专用设备时,可监测以下参数:
○ 麻醉深度:通过掐指检查;
○ 呼吸频率和模式:正常未受干扰的呼吸率约为 70-120 bpm,麻醉期间可接受 50% 的缓慢下降速率;
○ 粘膜颜色:应为粉红色而非蓝色或灰色;
○ 体温:可使用直肠温度计监测体温,体温应保持在 35.8-37.5 ℃之间 ;
○ 血氧饱和度和心率:可用专用的啮齿类动物脉搏式血氧仪监测血氧饱和度 (> 95%) 和心率(300-550 bpm);
○ 如对监护或监护设备有任何问题,请与所在机构的兽医联系。
• 保温:所有种属在麻醉状态下均存在低体温的风险。由于大鼠体表面积与体重比高,尤其易受影响。低体温对动物会产生显著的生理应激,可能延长恢复时间并有潜在致命风险。
○ 在所有麻醉过程中提供额外的保温措施。
○ 补充热源包括循环水毯、电热垫和可在微波或水浴中加热的市售产品(如等温垫或凝胶加热器)。
○ 切勿直接将动物放在热源上。
○ 如对使用或购买额外的保温来源有疑问,请与您所在机构的兽医联系。
• 补液:在麻醉时间较长或动物患病、老年或虚弱的情况下,可考虑皮下或腹腔注射温热的液体。更多信息请咨询您的兽医。
• 恢复:持续监测动物至其完全恢复。
○ 在干净的笼子里,将动物放在纸巾上(不使用垫料),以最大程度地减少气管阻塞或肺炎的风险。
○ 麻醉后的动物单独放在一个笼子里进行恢复。
○ 恢复期间继续保温。
○ 当动物能走动时,将其送回原笼中子,并提供饲料和水。
○ 根据所进行的手术,为了避免同笼伙伴啃缝线或切口处的创伤,大鼠可能需要在术后阶段单独饲养。任何单笼饲养的计划都应包括在IACUC方案中,以便进行审查和批准。
麻醉药物和操作
• 吸入麻醉剂: 异氟烷是首选的吸入麻醉剂。 起效快、恢复可靠。
A. 吸入麻醉可以通过滴瓶法、诱导室、面罩或气管插管使用精密蒸汽器进行。
i. 滴瓶法:
a.请勿使大鼠直接接触液体吸入麻醉剂(可通过在棉花或纱布上放置不可渗透的网格来实现)。
b. 由于无法控制室内的麻醉剂浓度,并且浓度可能迅速达到有毒水平,因此该方法仅适用于非常短的手术,如皮下肿瘤植入或面罩麻醉前的诱导。
ii. 诱导室、面罩和气管插管:
a. 这些需要配备氧气源和精密蒸发器的气体麻醉机。一些研究单位可能使用室内空气而不是纯氧作为气源,这也是可接受的。
b. 蒸发器必须与特定的吸入麻醉剂兼容。
c. 由于大鼠呼吸能力较小,使用非循环呼吸系统。
iii. 当使用吸入性麻醉时,使用通风柜或配备气体清除系统的麻醉系统,以尽量减少职业暴露于排出气体。
B. 注射麻醉剂:氯胺酮/赛拉嗪联合使用是大鼠的首选注射麻醉剂。
下面列出了其他常用的注射剂。
i. 大鼠对各种麻醉药的敏感性差异显著。 年龄、体质、品系、健康状况、基因调控和性别等因素都可能影响麻醉敏感性。以下剂量仅为一般指导原则,基于上述因素可能存在显著差异。在您的方案中添加麻醉剂时,建议提供一个范围,以允许根据每只动物的特定需求进行给药。
ii. 不建议在大鼠中进行肌肉注射(IM),因为可能导致组织刺激、跛行和自残等并发症。
*一个很好的初始方案是 100 mg/kg 氯胺酮和 7 mg/kg 塞拉嗪。
**阿替帕唑(5 mg/ml)的浓度是右美托咪定(0.5 mg/ml)的10倍。逆转右美托咪定,阿替帕唑的体积需是右美托咪定的4~6倍。但是,如果右美托咪定的给药体积和阿替帕唑相同,此时阿替帕唑的体积会是右美托咪定的10倍。由于阿替帕唑的安全边际高,所以这样做也是安全的。紧急情况下,可以采用这一体积进行逆转,无需计算确切剂量。
同样,使用与塞拉嗪(20 mg/mL)等体积的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆转也有效。虽然塞拉嗪具有更高的浓度(20 mg/mL),但阿替美唑(5 mg/mL)更纯净,且与α2 受体结合更紧密,因此等体积逆转塞拉嗪也可行。
提醒:鉴于国内某些厂家供应的赛拉嗪存在浓度跟包装不匹配问题,以及质量可能存在不稳定问题,请咨询机构兽医后再使用。
C.注射麻醉剂的一种类型是局部麻醉剂。
i. 局麻药通过特异性结合神经细胞膜上的电压门控 Na+ 通道来阻断神经冲动。
ii. 给药途径包括粘膜(鼻、眼等)局部给药或直接注射到组织和神经束周围。
iii. 在疼痛刺激(如切口)之前给予局部麻醉剂被认为是辅助镇痛药物,与阿片类和非甾体抗炎药(NSAID)一起使用。
iv. 由于持续时间较短(数小时),不鼓励将局部麻醉剂作为主要镇痛药物使用。