在实验动物的饲养或使用的过程中，实验动物从业者需要尽可能地去降低动物的疼痛和应激水平，来减轻其对动物健康和福利的影响。首先，我们需要从机构层面对实验动物相关活动可能造成的疼痛和应激水平进行分级，以便后续做好相关的管理工作，来确保动物的健康和福利。

下面，我们基于美国农业部的动物疼痛和应激分级标准，将实验动物的相关操作进行分级，并列举不同分级相对应的操作，供大家参考借鉴。

PART 01

等级B：无疼痛或应激

举例：

1、描述在没有受到任何研究干预的情况下的动物饲养，可能是作为实验的对照组，或等待进入其他实验。

2、指在自然环境中观察动物行为而不干扰其活动或改变环境，这属于非侵入式研究。

3、涉及对动物进行身体约束以执行预防性医疗操作（例如常规疫苗接种），这是基于动物福利的基本医疗措施。

4、日常的动物饲养和管理工作，例如饲喂、清洁和环境维护，确保动物的基本健康和福利。

PART 02

等级C：不产生疼痛或应激，或仅产生短暂轻微不适，无需使用镇痛药物。

举例：

1、抓取、称重或运输动物（在非紧张条件下进行相对短距离的移动）：非侵入性且压力较小的活动，前提是以人道和受控的方式进行。

2、注射（无刺激性）、采集血液或对浅表血管进行导管插入：轻微的操作，通常用于医疗或研究目的，在经过专业训练的人员操作下会使动物的不适感降到最低。

3、死后采集体液或组织：在动物安乐死后进行，因此不会对动物造成疼痛或不适。

4、动物纹身：用于动物编号的常见方法。虽然可能引起短暂不适，但正确操作时被认为是微创的。

5、啮齿类动物耳部穿孔：实验动物常用的标记方法。如操作迅速且得当，仅会造成轻微的不适。

6、常规体格检查：非侵入性的健康检查，旨在确保动物的健康。

7、观察动物行为：非侵入性活动，不干扰或改变动物的正常行为或环境。

8、无临床疼痛或不适表现的研究：设计或开展时避免对动物造成疼痛或不适的研究。

9、美国兽医协会（AVMA）认可的人道安乐死程序：确保安乐死以最人道的方式进行。

10、观察性研究或活体捕捉：在动物自然栖息地进行观察或暂时捕捉，采取措施（如提供庇护和食物）以尽量减少压力并确保其生存。

PART 03

等级D：产生超过短暂轻微的疼痛或应激，但已使用麻醉、镇痛、镇静药物进行缓解。

举例：

1、可能导致压力的动物运输，需要使用镇静剂。

2、存活性或终末外科手术程序。

3、在麻醉状态下进行眼眶采血。

4、对超过21日龄的小鼠进行尾部活体组织活体取材。

5、暴露血管以进行导管植入。

6、在麻醉状态下进行放血和/或灌流。

7、基因改造的表型引发疼痛或不适，但会通过措施缓解。

8、使用完全弗氏佐剂。

9、进行眼部和皮肤刺激性测试，但疼痛和不适会得到缓解。

10、任何术后结果导致明显的疼痛，例如：食欲或活动水平下降，对触摸产生不良反应、皮肤开放性病变、脓肿、跛行、结膜炎、角膜水肿或畏光，但可以通过镇痛药缓解。

11、超出正常术前准备所需的食物或水剥夺。

12、无法立即逃离的有害电击。

13、意识清醒状态下的瘫痪或运动障碍。

PART 04

等级E：产生明显的疼痛或应激，且无法使用镇痛药物（否则会影响实验结果），必须提供书面科学依据并经IACUC批准。

举例：

1、眼部或皮肤刺激性测试。

2、烧伤或创伤。

3、辐射病。

4、毒理学或微生物学测试、癌症研究或传染病研究，需要持续进行直至出现临床症状或动物死亡；通过实验引发疾病，包括代谢性和营养性疾病或因接触毒素引起的疾病。

5、因突变导致的慢性疼痛或虚弱，且无法通过镇痛药或适当干预来缓解。

6、超出普通术前准备需要或对动物造成压力的食物或水剥夺。

7、无法避免或逃避的有害刺激（如电击）。

8、未使用麻醉剂的情况下，通过麻痹或限制性药物进行固定，或长时间的强制性固定。

9、暴露于异常或极端的环境条件下。

10、表现出类似精神病的行为，暗示动物处于痛苦或不适的状态，无论是否由操作引起。

11、行为或测试导致笼中同伴或自身受伤。

12、允许在没有干预的情况下导致动物死亡的研究。

13、允许导致疼痛或应激的终点的研究（如未经治疗的成瘾性药物戒断、疼痛研究）。

14、因合理的研究目的而不得不剥夺所需的镇痛剂、镇静剂或麻醉剂的任何操作。

15、使用非美国兽医协会认可的程序进行安乐死。

当然，不同的机构可以根据自身业务的特点，制定合适的疼痛或应激分级标准，并对标准进行合理的描述或定义，便于实验动物使用者在申请实验动物使用时进行疼痛或应激定级，也便于IACUC在审核实验动物使用申请时有据可依。