在创新药非临床安全性评价当中，药物引发的心脏损伤，直接关系到项目推进节奏，也是申报阶段主要关注的风险点。食蟹猴的心脏解剖结构、循环生理和人相似度高，是抗肿瘤药、抗体类药物开展心血管安全性评价常用的非人灵长类模型。

以往心脏毒性评估，大多依靠心肌生化标志物、心电监测以及终点病理检查。但这套方式存在明显局限：肌钙蛋白、心肌酶出现异常，往往已经发生心肌细胞坏死；心电只能反映电活动改变，看不到心脏结构和泵血功能；病理又是实验结束后的静态结果，没办法在同一动物身上，完成多个时间点的动态观察。

超声心动图属于无创检测手段，可以重复开展，能够定量观察心脏结构、收缩舒张功能以及血流变化，能够发现还没有出现生化、病理改变的亚临床心肌损伤。在GLP毒理试验里，是完善心脏安全性证据链非常重要的技术手段。

PART.1、超声心动图在食蟹猴心脏毒性评价中的实际价值

结合日常试验实操来看，心超相比传统检测手段，优势十分明显：

1. 可以更早发现亚临床毒性很多时候生化、心电指标还没有出现异常，超声就能够捕捉到心肌水肿、室壁运动不协调、心室顺应性下降这类功能性改变。不少药物的心脏损伤，优先体现在功能层面，等到生化指标升高，损伤已经发展到一定程度。

2. 实现同动物纵向连续观察 因为检测无创，给药前、给药期间、恢复期都可以对同一只动物反复检测。评价时优先采用动物自身前后对照，能够很大程度降低个体差异带来的干扰，区分是药物作用，还是动物本身的生理波动，这点在长期重复给药试验中尤为关键。

3. 兼顾结构与功能综合评估 超声可以同时看心脏解剖形态、收缩功能、舒张功能以及大血管血流情况，不再只盯着心肌坏死这一个终点，得到的评价结果会更系统。

4. 契合监管评价的实际要求 国内外药物安全性指导原则，都鼓励用影像学指标补充传统毒理终点。规范的超声数据，能够丰富药物心血管风险评估的依据，提升申报资料的完整性。

PART.2、食蟹猴心脏超声实操评价内容

结合实验室一线工作经验，食蟹猴心超主要从四个方面开展评估：

1. 二维灰阶结构观察扫查胸骨旁长轴、短轴、心尖四腔心这几个标准切面，观察心房心室大小、室壁厚度、心肌回声是否均匀、室壁运动是否协调，同时查看心包、瓣膜形态。

药物诱导的心脏损伤，常会表现为心肌回声改变、局部室壁运动减弱、心腔大小改变，或是新发心包积液。实操过程中一定要注意区分动物自发性病变和药物导致的改变，不能看到一点异常就直接判定为药物毒性。

2. M型超声评估收缩功能

主要测量左室舒张末期内径、收缩末期内径，计算射血分数、短轴缩短率，评估心肌整体收缩能力，观察有没有心肌重构。

射血分数、短轴缩短率是毒理试验里评估收缩功能较为常用的指标。这里要特别提醒：单次检测数值出现波动，不能直接判定毒性。只有指标持续、呈趋势性下降，同时结合其他指标综合佐证，才可以考虑药物对心肌收缩功能产生影响。

3. 脉冲多普勒评估舒张功能

通过二尖瓣口血流频谱，获取E峰、A峰、E/A比值、减速时间等舒张功能相关参数。

不少抗肿瘤、靶向药物，早期心脏毒性优先影响的是舒张功能，舒张指标异常往往早于收缩功能下降。但食蟹猴的心率很容易受镇静药物干扰，舒张功能参数对操作标准化要求很高，操作不规范很容易出现假阳性，实际试验中要着重做好质控。

4. 彩色多普勒血流评估

用来观察主动脉、肺动脉血流速度，以及瓣膜有没有反流。健康食蟹猴本身就可能存在轻微瓣膜反流，属于本底现象。只有出现新发反流、原有反流程度加重，才可以作为辅助参考，不能单凭瓣膜反流就下毒性结论。

PART.3、试验质控要点

在GLP试验环境下，超声图像、测量数据的规范性，直接决定结果能不能用于申报，实际工作中要把控好这几点：

1. 镇静条件保持统一 尽量使用尽可能低有效镇静剂量，避免深度镇静减缓心率和血流，造成假阳性结果。每一次检测都建议记录动物实时心率，后续分析的时候纳入参考。

2. 应当建立给药前基线 所有动物都要采集给药前的超声基线。毒性判断优先依靠动物自身前后对比，同时参考群体基线范围，不能单纯套用参考区间做判断。

3. 检测参数统一，双人复核 统一探头、深度、增益、取样角度。测量指标选取3‑5个稳定心动周期取平均值。操作人员需要经过非人灵长类心超专项培训，测量结果建议双人复核。

4. 尽量减少动物应激干扰 做好术前禁食，减少肠道气体造成图像伪影；维持动物体温稳定，尽量降低应激，保证呼吸平稳，才能拿到质量可靠的图像与数据。

PART.4、总结

超声心动图不能替代心肌标志物、心电和病理检查，但可以弥补传统手段在早期预警、动态监测、功能量化上的短板。

在严格的GLP质控前提下，食蟹猴心脏超声能够识别药物引起的早期、可逆的亚临床心肌损伤，清晰反映毒性发生、发展以及恢复过程，为创新药非临床心血管安全性评价提供扎实的影像学支撑。